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你知道固相萃取的操作步驟及其使用特點嗎

更新時間:2022-02-23  |  點擊率:850

  固相萃取(SPE)是利用固體吸附劑將樣品中的目標化合物吸附,與樣品的基體和干擾化合物分離,然后再用洗脫液洗脫,達到分離和和富集的目的。先使樣品通過一裝有吸附劑(固相)小柱,保留其中某些組分,再選用適當?shù)娜軇_洗雜質,然后用少量溶劑迅速洗脫,從而達到快速分離凈化與濃縮的目的。

  固相萃取的操作步驟:

  針對填料保留機理的不同(填料保留目標化合物或保留雜質),操作稍有不同。

  目標化合物保留模式

  固相萃取操作一般有四步:

  ①活化----除去小柱內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。

  ②上樣----將樣品用一定的溶劑溶解,轉移入柱并使組分保留在柱上。

  ③淋洗----Z大C度除去干擾物。

  ④洗脫----用小體積的溶劑將被測物質洗脫下來并收集。(注意流速不要過快)

  雜質保留模式:

  固相萃取操作一般有三步:

  ①活化----除去柱子內的雜質并創(chuàng)造一定的溶劑環(huán)境。

  ②上樣----將樣品轉移入柱,此時大部分目標化合物會隨樣品基液流出,雜質被保留在柱上,故此步驟要開始收集。

  ③洗脫----用小體積的溶劑將組分淋洗下來并收集,合并收集液。(注意流速不要過快)

  固相萃取(SPE)使用特點:

  樣品溶液體系性質要與固相萃取要求相適應。例如:在C18吸附待測化合物的模式中,樣品溶液體系中有機溶劑的比例不能太高;在C18吸附樣品基質的模式中,樣品溶液體系中有機溶劑的比例不能太低。

  要注意填料承載能力,防止上樣超載導致檢測結果不準確。

  過柱流速要合適,不能過快或過慢,特別是樣品溶液上柱和洗脫兩個環(huán)節(jié)的過柱速度要控制。一般過柱流速為1~3mL/min。

  對于使用硅膠基質的SPE小柱在樣品溶液上柱前不能干涸。如果干涸了應該重新對小柱進行活化。

  
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